产品货号:
KL221181
中文名称:
双链DNA定量试剂盒
英文名称:
Hoechst33258 dsDNA Assay Kit
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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对dsDNA进行准确定量是很多重要的分子生物学实验的前提。不同的定量方法有不同的线性范围和检测灵敏度,对干扰的屏蔽能力也各不相同。其中,OD260测定法操作最简单,但灵敏度只有5μg/mL,不能屏蔽单链DNA、RNA和核苷酸的干扰。为此本公司开发了基于H33258荧光染料的dsDNA定量产品。
- 即开即用,用户不需要单独摸索最佳条件。
- 操作简单,只需要将H33258工作液与待测样品混合即可。
- 彻底屏蔽RNA的干扰,同样浓度RNA产生的荧光不超过DNA的1%,尤其适用于直接用细胞裂解液测定DNA浓度(此时有大量RNA存在)。但需要先将细胞裂解液稀释到NaCl浓度不超过3M,SDS浓度不超过0.01%。
- 提供阳性对照DNA,用于制备标准曲线。阳性对照DNA AT含量为59%。
- 需要激发波长为365nm,发射波长为458nm的荧光仪。可选用比色皿检测模式或多孔板检测模式。
- 灵敏度比OD260测定法高500倍,为10ng/mL。
- 线性范围为10ng/mL-10mg/mL。
- Hoechst 33258荧光染料与单链DNA结合时发出的荧光并不会与单链DNA浓度成比例,故能部分屏蔽单链DNA的干扰。
- 所用H33258染料对dsDNA具有高度选择性,主要识别AT区。
组分 | 规格 |
Hoechst33258-DNA结合液 | 1mL |
dsDNA定量阳性对照(10mg/mL) | 1mL |
Hoechst33258染液(10mg/mL) | 10mL |
保存:2~8℃,有效期6个月。
本试剂盒提供的试剂盒足够满足100次1mL体系测定所需的用量,每次用10μL样品。
能检测激发波长为365nm,发射波长为458nm的荧光仪
- 将Hoechst33258用Hoechst33258-DNA结合液稀释成1mg/mL,此为工作液,放冰上待用。
- 打开仪器预热10~15分钟。
- 将DNA阳性对照用Hoechst33258-DNA结合液稀释成100μg/mL、10μg/mL、1μg/mL、100ng/mL、10ng/mL、0mg/mL共六个浓度。
- 将Hoechst33258染料工作液和上述六个溶液混合,测定458nm光吸收(激发波长为365nm)。
- 将Hoechst33258染料工作液和样本1∶1混合,测定458nm光吸收(激发波长为365nm)。
- 制作标准曲线应从中确定样本中的DNA浓度。
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